Za Službu:
Rockefellerova br. 12
  tel. (+385 1) 48 63 236
hzzjz-virologija@zg.t-com.hr
 

Literatura:
1. Murray. Clinical Microbiology, 8th edition
2. Master RN.Mycobacteriology. In: Isenberg HD (ed).Clinical microbiology procedures handbook. Washington:American Society for Microbiology,1992

Uzorci:

-          Stolica (feces)

-          Perianalni otisak

-          Obrisak ždrijela i tonzila

-          Nazofaringealni sekret

-          Obrisak larinksa

-          Sputum (iskašljaj)

-          Inducirani sputum

-          Uzorak aspirata bronha i bronhoalveolarnog lavata (bal)

-          Želučani aspirat/lavat

-          Uzorci  pleuralne, peritonejske i zglobne tekućine

-          Obrisak spojnice oka

-          Uzorak strugotine rožnice

-          Uzorci iz rane, ulkusa, apscesa i dekubitusa

-          Bioptički uzorak tkiva

-          Uzorci za serološke  pretrage

-          Krv za hemokulturu

-          Uzorak krvi za izradu preparata

-          Uzorak koštane srži

-          Cerebrospinalni likvor

-          Urin (mokraća)

-          Obrisak cerviksa, vagine i uretre i ejakulat-eksprimat

STOLICA (FECES)

 Uzorak stolice za bakteriološku pretragu

·         uzorak stolice uzeti na početku bolesti, u pravilu prije početka antibiotičkog liječenja;

·         uzorak stolice ne smije biti kontaminiran mokraćom ili sadržavati dezinficijense i deterđente;

·         potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka čvrste stolice  (veličina lješnjaka) u sterilnoj posudici koja se stavi u drvenu kutijicu;

·        uzorak stolice treba dostaviti u laboratorij najkasnije 2 sata od uzimanja. Ukoliko to nije moguće, uzorak se može pohraniti na +4°C najduže 24 sata do dostave u laboratorij. Preporučuje se uzorak stolice veličine zrna papra staviti u transportni medij i poslati u laboratorij;

·        obrisak rektuma uzeti jedino kada nije moguće dobiti uzorak stolice (djeca, teški bolesnici). Bris uložiti  2,5 cm iza analnog  sfinktera i nježno zarotirati. Na brisu moraju biti vidljivi tragovi stolice. Daljnji postupak kao s uzorkom stolice;

·         obrisak rektuma za izolaciju vrste N. gonorrhoeae treba slati u transportnom mediju;

·         rezultati bakteriološke pretrage uzorka stolice ili obriska rektuma dostupni su za 3 dana.

 Uzorak stolice za virološku pretragu

·        uzorak stolice uzeti u prva 3 dana od početka  simptoma (najbolje 2 uzorka stolice unutar  24 sata);

·        potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka čvrste stolice  (veličina lješnjaka) u sterilnoj posudici;

·        uzorak stolice treba odmah dostaviti u laboratorij a ako to nije moguće uzorak može biti pohranjen na +4°C najduže tijekom 48 sati. Dostavlja se u putnom hladnjaku ili termos boci;

·        ako nije moguće uzorke stolice dostaviti tijekom 48 sati, treba se posavjetovati s liječnikom mikrobiologom;

·         uzorak stolice može biti pohranjen duže vrijeme na temperaturi od –18°C i niže;

·         zamrznuti uzorak stolice treba dostaviti u laboratorij na ledu u termos boci;

·         rezultati virološke pretrage uzorka stolice dostupni su za  2-14 dana.

 Uzorak stolice za parasitološku pretragu

·        potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka čvrste stolice  (veličina lješnjaka);

·        uzorak stolice treba odmah dostaviti u laboratorij ili ga pohraniti na +4ºC tijekom 24-48 sati;

·        za dokaz amebne dizenterije uzorak proljevaste stolice mora biti pregledan najduže 30 minuta od uzimanja stoga preporučujemo prethodni dogovor s liječnikom mikrobiologom;

·        7 dana prije uzimanja uzorka stolice, bolesnik  ne smije biti pregledan radiološki uz pomoć kontrastnog sredstva, jer ovaj postupak umanjuje vjerojatnost nalaza cista crijev-nih protista;

·        za dokaz kriptosporidioze rutinski se obrađuju samo uzorci proljevaste stolice - kada se kriptosporidioza želi dokazati pretragom uzorka čvrste stolice potrebno je to naznačiti na uputnici;

·         rezultati parasitološke pretrage uzorka stolice dostupni su za 1-3 dana.

 Uzorak stolice za mikološku pretragu

·        potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka čvrste stolice (veličina lješnja-ka);

·         uzorak stolice treba odmah dostaviti u laboratorij ili ga pohraniti na +4ºC tijekom 24-48 sat;

·         uzorak stolice treba uzeti 7-10 dana nakon završene antibiotičke terapije;

·         rezultati mikološke pretrage uzorka stolice dostupni su za 3-5 dana.
 

PERIANALNI OTISAK

 Perianalni otisak za dokaz jaja parasita  Enterobius vermicularis

·        predmetno stakalce (26 x 76 mm) s ljepljivom trakom («selotejp») može se dobiti u parasitološkom laboratoriju Službe za mikrobiologiju Zavoda ili se načiniti u ambulanti;

·        perianalni otisak uzeti ujutro nakon ustajanja, a prije pranja ili kupanja;

·        ljepljivu traku treba odlijepiti sa stakalca, raširiti gluteuse i nalijepiti traku preko perianalnih nabora uz blago pritiskanje;

·         traku zatim skinuti i nalijepiti ponovo preko stakalca;

·         predmetno stakalce staviti u ambalažu i dostaviti u laboratorij tijekom 24 sata;

·         rezultat pretrage dostupan je za 24 sata.

OBRISAK ŽDRIJELA I TONZILA

Obrisak ždrijela i tonzila za bakteriološku pretragu

·        drvenom lopaticom pritisnuti jezik i laganom rotacijom štapića obloženog vatom (bris) uz pritisak obrisati tonzile, tonzilarne lože i ždrijelo pazeći da se ne dotakne jezik ili sluznica usne šupljine;

·         kada su vidljivi gnojni čepići na tonzilama treba ih obrisati;

·         uzorak treba dostaviti u laboratorij unutar 2 sata od uzimanja;

·        ako to nije moguće obrisak treba uložiti u Stewart transportni medij, pohraniti na  sobnoj temperaturi (22-25°C) i dostaviti u laboratorij unutar 24 sata;

·         rezultati bakteriološke pretrage dostupan je za 1-3 dana.

Obrisak ždrijela i tonzila za mikološku pretragu

·         drvenom lopaticom pritisnuti jezik i laganom rotacijom uz pritisak  štapićem obloženim vatom obrisati tonzile, tonzilarne lože i ždrijelo pazeći da se ne dotakne jezik ili sluznica usne šupljine;

·         kada su vidljivi gnojni čepići na tonzilama treba ih obrisati;

·        uzorak treba dostaviti u laboratorij unutar 24 sata ili obrisak može biti uzet u laboratoriju Službe za mikrobiologiju Zavoda;

·         rezultati mikološke pretrage dostupni su za 3-5 dana.

Duboki obrisak ždrijela (stražnje stijenke farinksa) i obrisak nazofarinksa za virološku pretragu

·        duboki obrisak ždrijela (stražnje stijenke farinksa) uzeti rotirajućim pokretima, uz pritisak, izbjegavajući jezik, tonzile i sluznicu usne šupljine;

·         obrisak nazofarinksa uzima se kao i za bakteriološku pretragu;

·         obrisak se uzima u prva tri dana bolesti;

·        obrisak treba uroniti u transportnu podlogu (Hanks), pohraniti na +4°C i dostaviti u laboratorij najkasnije tijekom 24 sata;

·        u nedostatku transportne podloge može se koristiti sterilna fiziološka otopina, uz naznaku na uputnici;

·         suhi obrisak i obrisak pohranjen na -18ºC nije pogodan za virološke pretrage;

·         rezultati virološke pretrage dostupni su za 24 sata.

NAZOFARINGEALNI SEKRET

Uzorak nazofaringealnog sekreta za virološku pretragu

·         uzima se u manje djece mukoznim ekstraktorom, vakuum pumpom i sondom uz eventualnu prethodnu aplikaciju 1 mL sterilne fiziološke otopine;

·        uzorak u dobro zatvorenom ekstraktoru treba odmah poslati u laboratorij ili pohranjenog na +4ºC dostaviti u laboratorij najkasnije unutar 24 sata od uzimanja;

·         najkvalitetniji je uzorak gornjeg dišnog sustava za virološku pretragu;

·         rezultati virološke pretrage dostupni su za 24 sata.

OBRISAK LARINKSA

Obrisak larinksa na mikobakteriološku pretragu

• obrisak larinksa treba uzeti ujutro, na tašte, u  bolesnika koji ne može dati dobar uzorak iskašljaja;

• obrisak treba prije uzimanja umočiti u sterilnu destiliranu vodu ili fiziološku otopinu a metalni dio lagano saviti da prati krivinu jezika;

• neposredno prije uzimanja obriska bolesnik se mora nakašljati;

• uzorak treba što prije dostaviti u laboratorij ili pohraniti na +4º C do slanja u laboratorij;

• izravna pretraga za dokaz  Mycobacterium tuberculosis (mikroskopija i molekularna dijagnostika) traje 24 sata;

• kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

• ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

SPUTUM (ISKAŠLJAJ)

Uzorak sputuma za bakteriološku i mikološku pretragu

·    jutarnji iskašljaj je najpogodniji uzorak;

·     prije uzimanja sputuma bolesnika treba uputiti o ispravnom postupku davanja uzorka;

·     bolesnik treba oprati zube četkicom bez zubne paste i isprati usta vodom da bi se smanjio broj popratnih bakterija, dijelova hrane ili ostataka lijekova;

·      kad god je moguće, poželjno je nadzirati davanje uzorka iskašljaja;

·      važno je upozoriti bolesnika da nazofaringealni sekret ili slina nisu iskašljaj;

·      bolesnik se treba duboko nakašljati i izbaciti iskašljaj (5-10 mL) u sterilnu posudu;

·     uzorak iskašljaja treba dostaviti  u laboratorij u roku od 2 sata, najkasnije 24 sata od uzimanja uz pohranu na +4°C;

·     za dokaz tuberkuloze preporučuje se uzimanje serije od najmanje tri uzorka iskašljaja (u sterilnoj posudici s čepom na navoj) tijekom tri uzastopna dana (obično ne više od šest). Posudica mora biti dostavljena u plastičnoj vrećici. Ne skupljati više uzoraka u jednoj po-sudici;

·     za dokaz pneumocistoze iskašljaj nije odgovarajući uzorak (pogodni uzorci kliničkog materijala su bronhoalveolarni lavat, inducirani sputum i bioptat pluća);

·      rezultati standardne bakteriološke pretrage dostupni su za 2-5 dana;

• rezultati izravne dijagnostike tuberkulpze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) do-stupni su za 24 sata;

• kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

• ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana;

• rezultati mikološke pretrage dostupni su za 3-7 dana.

INDUCIRANI SPUTUM

Uzorak induciranog sputuma na mikobakteriološku i mikološku pretragu

·         prije inhalacije bolesnik treba isprati usnu šupljinu vodom i očistiti zube četkicom (bez zubne paste) i popiti 2 čaše vode;

·         za inhalaciju se koristi oko 25 mL 3-5% sterilne otopine NaCl;

·         bolesnik inhalira aerosol uz pomoć ultrasoničnog inhalatora oko 20 minuta;

·         tijekom inhaliranja, svakih 5 minuta, bolesnik duboko iskašlje u sterilnu posudu (svaki iskašljaj posebno);

·         uzorak induciranog iskašljaja koristi se za dokaz Mycobacterium tuberculosis (i drugih vrsta mikobakterija) te dokaz Pneumocystis carinii (i drugih vrsta gljiva);

• izravni dokaz Mycobacterium tuberculosis (mikroskopija i molekularna dijagnostika) traje 24 sata;

• kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

• ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana;

• izravni dokaz Pneumocystis carinii traje 3-24 sata (kultivacija nije moguća);

• izravna dijagnostika drugih gljivičnih vrsta traje također 24 sata a kultivacija 7-28 dana (za dokaz termalno dimorfnih gljiva).

UZORAK ASPIRATA BRONHA I BRONHOALVEOLARNOG LAVATA (BAL)

Uzorak aspirata bronha i bronhoalveolarnog lavata za mikobakteriološku pretragu

• treba poslati što veću količinu uzorka uz što manji sadržaj anestetika koji može spriječiti rast mikobakterija;

• uzorak treba što prije dostaviti u laboratorij ili ga treba pohraniti do dostave na +4ºC;

• rezultat izravne dijagnostike tuberkuloze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupan je za 24 sata;

• kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

• ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Uzorak aspirata bronha i bronhoalveolarnog lavata za mikološku pretragu

• treba poslati što veću količinu uzorka;

• uzorak treba odmah po uzimanju dostaviti u laboratorij ili ga treba pohraniti do dostave na + 4ºC;

• rezultat izravne dijagnostike (mikroskopija)  plućne mikoze (i pneumocistoze) dostupan je za 24 sata;

• rezultati izolacije i identifikacije gljiva dostupan je za 3-7 dana.

ŽELUČANI ASPIRAT/LAVAT

Uzorak želučanog  aspirata/lavata za mikobakteriološku pretragu

• uzorak se najčešće uzima djeci koja ne mogu dati iskašljaj niti nakon inhalacije aerosola;

• poterbno je aspirirati 50 mL želučanog sadržaja rano ujutro dok bolesnik još leži u krevetu, nakon mirovanja od najmanje 8-10 sati;

• odmah po uzimanju uzorak treba neutralizirati otopinom Na₂HPO₄  (na 35-50 mL lavata dodati 1,5 mL 40% Na₂HPO₄);

• rezultat izravne dijagnostike tuberkuloze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupan je za 24 sata;

• kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

• ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28.

UZORCI  PLEURALNE,  PERITONEJSKE  I  ZGLOBNE TEKUĆINE

Uzorci pleuralne, peritonejske i zglobne tekućine za bakteriološku i mikološku dijagnostiku

• najmanje 1 mL uzorka (u sterilnoj epruveti s čepom na navoj) treba poslati odmah u laboratorij;

• ako to nije moguće uzorak treba pohraniti na +4ºC i dostaviti u laboratorij unutar 24 sata od uzimanja;

• rezultati izravne dijagnostike (mikroskopija i /ili imunodijagnostika) dostupni su za 24 sata;

• rezultati izolacije i identifikacije aerobnih bakterija i kvasaca dostupni su za 5-7 dana;

• rezultati izolacije anaerobnih bakterija dostupni su za 12-18 dana;

• rezultat izravne dijagnostike tuberkuloze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupan je za 24 sata;

• kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

• ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

OBRISAK SPOJNICE OKA

Obrisak spojnice oka za bakteriološku, virološku i mikološku pretragu

·        ako nema dovoljno eksudata (spojnica je suha) prije uzimanja obriska, obrisak (drveni štapić s vatom) treba umočiti u transportni medij ili sterilnu fiziološku otopinu;

·        treba dobro obrisati spojnicu donje vjeđe i forniksa od vanjskog prema unutarnjem kutu oka;

·        ako treba uzeti obrisak spojnice oba oka, za svako oko treba koristiti poseban bris i dostaviti u laboratorij odvojeno, svakog u svojem sterilnom kontejneru;

·         uzorci se mogu uzeti u laboratorijima Službe za mikrobiologiju Zavoda ili mogu biti uzeti u ambulantama;

·         obriske treba dostaviti u laboratorij što prije, najbolje u roku od dva sata;

·        ako to nije moguće obriske u transportnoj podlozi treba dostaviti tijekom 24 sata. Uzorke za bakteriološku i mikološku pretragu treba dostaviti u torbi na 20-25ºC, a uzorke za virološku pretragu u termosici na +4°C;

·        za dokaz trahoma preporučujemo uzimanje obrisaka spojnice oka u laboratorijima Službe za mikrobiogiju ili prema dogovoru s liječnikom mikrobiologom;

·        rezultati bakteriološke pretrage dostupni su za 4 dana (gram-pozitivne i gram-negativne bakterijske vrste), a do 7 dana (klamidije);

·         rezultati mikološke pretrage dostupni su za 5-7 dana;

·         rezultati virološke pretrage dostupni su za 24 sata.

UZORAK STRUGOTINE ROŽNICE

Uzorak strugotine rožnice za parasitološku pretragu 
 

·         za dokaz amebnog keratitisa treba uzeti strugotinu (abrazivni materijal) rožnice, staviti u 1 mL Pageove ili sterilne fiziološke otopine i dostaviti što prije u laboratorij;

·         preporučujemo prethodno kontaktirati liječnika mikrobiologa radi pripreme podloge;

·         preporučujemo uzorak uzeti  u parasitološkom laboratoriju uz prethodni dogovor;

·         rezultati parasitološke pretrage dostupni su za  1-14 dana.

Uzorak strugotine rožnice za mikološku pretragu

·         za dokaz gljivične infekcije rožnice (keratomikoze) treba uzeti strugotinu rožnice, staviti u 1 mL sterilne fiziološke otopine i dostaviti što prije u laboratorij (za izolaciju gljiva);

·         preporučuje se strugotine rožnice pohraniti  u sterilnu epruvetu te odmah dostaviti u laboratorij (radi izrade mikroskopskih preparata);

·         rezultat izravne dijagnostike (mikroskopija) keratomikoze dostupan je za 24 sata;

·         rezultati izolacije i identifikacije gljiva dostupni su za 5-7 dana.

UZORCI IZ RANE, ULKUSA, APSCESA I DEKUBITUSA

Uzorci iz rane, ulkusa, apscesa i dekubitusa za bakteriološku i  mikološku  pretragu

·         ranu, ulkus, apsces i dekubitus treba očistiti sterilnom fiziološkom otopinom, a okolnu kožu sa 76%-tnim alkoholom;

·         kruste i nekrotično tkivo treba odstraniti;

·         uzorak treba uzeti s odgovarajućeg mjesta – s ruba rane, uz stijenke apscesa;

·         za dokaz uzročnika može se koristiti aspirat, komadići tkiva ili stijenke apscesa. Obrisak centra rane ima najmanju dijagnostičku vrijednost;

·         uzorke treba dostaviti odmah u laboratorij;

·        ako to nije moguće uzorak treba pohraniti u  Stuartov transportni medij na sobnu tempera-turu (20-25°C) i dostaviti u laboratorij u roku od 24 sata;

·        na uputnici treba navesti vrstu uzorka, anatomsko mjesto odakle je uzorak uzet,  antimikrobnu terapiju i druge važne podatke o bolesniku (npr. diabetes mellitus, bolesti imunološkog sustava, liječenje kortikosteroidima i dr.);

·         na uputnici treba navesti koja se pretraga traži (npr. izolacija aerobnih i/ili anaerobnih bakterija, izolacija kvasaca, dokaz MRSA);

·         rezultati izolacije i identifikacije aerobnih bakterija i kvasaca dostupni su za 3-7 dana a anaerobnih bakterija za 12-18 dan.

Uzorci iz ulkusa za parasitološku pretragu

·        za pretragu na uzročnika kožne lišmanioze uzima se punktat zdravog ruba lezije. Injekcionom iglom sa špricom u kojoj se nalazi 1 mL sterilne fiziološke ubode se u zdravi rub lezije, nekoliko puta zarotira iglom, uštrca fiziološka otopina  i odmah aspirira. Dobiveni uzorak se odmah ucijepi u hranilište. Preporučujemo ovaj postupak načiniti u Parasitološkom laboratoriju Zavoda;

·        može se uzeti bioptički materijal sa zdravog ruba kožne promjene, staviti u 1 mL sterilne fiziološke otopine i dostaviti odmah u laboratorij.

BIOPTIČKI UZORAK TKIVA

Bioptički uzorak tkiva za bakteriološku, mikološku, virološku i parasitološku pretragu

• bioptat treba staviti u sterilnu fiziološku otopinu i odmah dostaviti u laboratorij;

• bioptički uzorak i aspirat za dijagnozu kožne lišmenioze preporučamo oduzeti u parasitološkom laboratoriju HZJZ;

• rezultati izravne dijagnostike (mikroskopije)  dostupni su za 24 sata;

• rezultati izolacije i identifikacije uzročnika dostupni su za 2-21 dan.

UZORCI ZA SEROLOŠKE PRETRAGE

Uzorak seruma ili krvi

• uzeti 3-5 mL krvi (10 mL ukoliko se traži više pretraga) natašte i bez antikoagulansa;

• u laboratorij može biti dostavljen uzorak krvi ili seruma;

• uzorak seruma može biti pohranjen nekoliko tjedana na +4-8°C, a na –18°C i mnogo duže;

•  uzorak krvi ne smije biti zamrznut jer nastupa hemoliza te je takav uzorak neupotreb –

            ljiv za serološko testiranje;

• hilozan, hemoliziran ili zagađen uzorak seruma nije pogodan za serološke pretrage;

• radi utvrđivanja dinamike protutijela treba uzeti parni serum u roku od 2-3 tjedna, a u bolesnika sa sumnjom na lymsku boreliozu  4-6 tjedana nakon prvog seruma;

• rezultat seroloških pretraga dostupni su za 2-7 dana.

Uzorak cerebrospinalnog likvora
 

·         uzorak likvora može biti ponekad korišten za serološke pretrage;

·         uzorak likvora ne smije biti hemoragičan a testira se usporedno s uzorkom seruma istog bolesnika;

·         pohranjuje se na isti način kao i uzorak seruma;

·         rezultat seroloških pretraga dostupni su za 2-7 dana.

Uzorci drugih tjelesnih tekućina

·         uzorci ostalih tjelesnih tekućina (npr. očna vodica) koriste se iznimno za serološke pretrage usporedno sa serumom  istog bolesnika.

KRV ZA HEMOKULTURU

Uzorak krvi (hemokultura) za bakteriološku i mikološku pretragu

·         uzorak krvi treba uzeti venepunkcijom u trenutku porasta tjelesne temperature u pravilu prije početka antibiotičke terapije;

·         ne preporučljivo uzimati uzorak krv iz intravenskog katetera;

·         uzorak krvi treba odmah uz bolesnički krevet ucijepiti u tekuće hranilište za kultivaciju aerobnih bakterija i gljiva (aerobno hranilište) i anaerobnih bakterija (anaerobno hranilište) prema uputi proizvođača hranilišta;

·         uzorke krvi za hemokulturu treba uzeti  2-3 puta tijekom 24 sata;

·         količina uzorka krvi: 3-10 mL krvi odrasle osobe u svaku bočicu;

·         količina uzorka krvi:1-3 mL krvi djece u svaku bočicu;

·        ucijepljena hranilišta (hemokulture) treba odmah dostaviti u laboratorij, a ako to nije moguće, hemokulture treba pohraniti u termostat na 37°C kroz 20 sati. Ako dostava niti tada nije moguća, hemokulture mogu biti pohranjene najduže 48 sati na 22-25°C i tada dostavljene u laboratorij u termos boci na istoj temperaturi;

·         za dokaz tuberkuloze treba uzeti 5-10 mL krvi u sterilnu epruvetu s čepom na navoj i dodati heparin (0,2 mg/mL) ili 1,5 mL 0,35% otopine natrijevog polietanol sulfata (SPS) na 8,5 mL krvi  da se spriječi grušanje krvi. Moguće je uzorak krvi odmah po uzimanju ucijepiti u komercijalno dostupne medije sa saponinom "Isolator tube" (Oxoid);

·         rezultati izolacije i identifikacije aerobnih bakterija dostupni su za 2-5 dana;

·         rezultati izolacije i identifikacije anaerobnih bakterija dostupni su za 12-18 dana;

·         rezultati izolacije i identifikacije gljiva (kvasaca i nekih vrsta plijesni) dostupni su za 3-7 dana;

• izravni dokaz Mycobacterium tuberculosis (mikroskopija i molekularna dijagnostika) traje 24 sata;

• kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

• ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

UZORAK KRVI ZA IZRADU PREPARATA

Uzorak krvi za parasitološku pretragu

·         za dokaz malarije treba uzeti jednu (za izradu preparata krvnog razmaza) i 2-3 kapi krvi (za izradu preparata guste kapi) iz jagodice prsta bolesnika;

·         za izradu preparata krvnog razmaza:

jednu kap krvi kapnuti na rub čistog predmetnog stakalca (veličina 26x76 mm) a drugim stakalcem položenim pod kutem od 45º razvući kap krvi u jednom potezu. Osušiti na zraku i poslati u laboratorij. 

·         za izradu preparata guste kapi:

na sredinu  predmetnog stakalca kapnuti 2-3 kapi krvi i vrhom drugog stakalca spojiti kapi u krug promjera 1,0 cm. Osušiti na zraku i poslati u laboratorij. 

·        za dokaz filarioze treba uzeti uzorke krvi za izradu preparata krvnog razmaza i guste kapi uzimajući u obzir periodično pojavljivanje mikrofilarija u krvnoj cirkulaciji (dnevno-noćni ritam). Zbog potrebe dodatnih pretraga krvi i tkiva u bolesnika oboljelih od filarioze preporučujemo konzultiranje liječnika mikrobiologa u Parasitološkom laboratoriju Zavoda;

·         Rezultati parasitoloških preraga krvi dostupni su u roku 24 sata.

UZORAK KOŠTANE SRŽI

Uzorak koštane srži za mikobakteriološku pretragu

• treba aspirirati najmanje 0,5 mL koštane srži u sterilnu epruvetu s ćepom na navoj i dodati heparin (0,2 mg/mL);

• uzorak aspirata koštane srži može se odmah po uzimanju ucijepiti u komercijalno dos-tupni medij sa saponinom "Isolator tube" (Oxoid);

• uzorak treba odmah dostaviti u laboratorij ili pohraniti na +4ºC;

• rezultat izravne dijagnostike tuberkuloze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupan je za 24 sata;

• kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

• ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Uzorak koštane srži za mikološku pretragu

• treba aspirirati najmanje 0,5 mL koštane srži u sterilnu epruvetu s ćepom na navoj i dodati heparin (0,2 mg/mL);

• uzorak treba odmah dostaviti u laboratorij;

• koštana srž najpogodniji je uzorak kliničkog materijala za dokaz histoplazmoze;

• rezultat izravne dijagnostike (mikroskopija) histoplazmoze dostupan je za 24 sata;

• rezultat kultivacije histoplazme dostupan je za 7-28 dana.

Uzorak koštane srži za parasitološku pretragu (na lišmaniozu)

• treba aspirirati 1-2 mL koštane srži u sterilnu epruvetu  s antikoakulansom;

• uzorak treba odmah dostaviti u laboratorij;

• preporučujemo uzorak koštane srži za kultivaciju odmah kod vađenja ucijepititi u hranilište «Tobie» prethodno naručenu u parasitološkom laboratoriju HZJZ i slijedeći pri tom priloženu uputu;

• koštana srž najpogodniji je uzorak kliničkog materijala za dokaz visceralne lišmenioze (kala azar);

• rezultat izravne dijagnostike (mikroskopija) lišmenioze dostupan je za 24 sata;

• rezultat kultivacije lišmenija dostupan je za 2-21 dana.

CEREBROSPINALNI LIKVOR

Uzorak likvora za bakteriološku i mikološku pretragu

·         uzorak likvora treba uzeti u bolničkoj ustanovi;

·         za bakteriološku pretragu uzorka likvora potreban je 1 mL likvora;

·         za mikološku pretagu uzorka likvora potrebna su 2 mL likvora;

·         uzorak likvora treba dostaviti u sterilnoj posudici u roku od 2 sata u termos boci na 20-37°C;

·         pri sumnji na gnojni meningoencefalitis treba uzeti i uzorke krvi za hemokulturu;

·        rezultat izravne dijagnostike (mikroskopije i molekularne dijagnostike) tuberkuloze dostupan je za 24 sata;

·         kultivacija mikobakterija traje do 6 tjedana;

·         ispitivanje osjetljivosti mikobakterija na antituberkulostatike traje 7-28 dana;

·        dijagnostika gnojnog meningitisa uzrokovanog drugim bakterijskim vrstama traje 2-3 dana;

·        rezultat izravne dijagnostike gljivičnog meningoencefalitisa (tuš preparat i imunodijagnostika) dostupan je za nekoliko sati;

·         kultivacija gljivičnih uzročnika meningoencefalitisa traje od 3-7 dana (ovisno o vrsti očekivanog gljivičnog uzročnika i do 28 dana).

Uzorak likvora  za virološku pretragu

·         uzorak likvora treba uzeti u bolničkoj ustanovi;

·         za virološku pretragu uzorka likvora potreban je najmanje 1 mL likvora;

·         uzorak likvora treba dostaviti u laboratorij  u roku od 2 sata;

·         uzorak likvora može biti pohranjen na +4ºC najduže tijekom 48 sati;

·         uzorak likvora može biti pohranjen na -70°C neograničeno dugo;

·         uzorak likvora ne smije biti pohranjen na –18°C (kućna ledenica);

·         zamrznuti uzorak likvora treba dostaviti u laboratorij na ledu u termos boci;

·         rezultati virološke pretrage dostupni su za 2-14 dana.

URIN (MOKRAĆA)

Uzorak mokraće za bakteriološku i mikološku pretragu

·        treba uzeti srednji mlaz prve jutarnje mokraće;

·        prije uzimanja uzorka mokraće potrebno je oprati vanjsko spolovilo toplom vodom i  sapunom, te osušiti papirnatom maramicom. Ukoliko pranje spolovila nije moguće preporučuje se sljedeći postupak:

              - u  žena:

1.       raširiti čistim prstima velike usne spolovila

2.       obrisati vanjsko spolovilo s 3-4 vlažne papirnate maramice povlačeći od naprijed prema nazad

3.       ispustiti prvi mlaz mokraće u toalet.

4.       izmokriti oko 50 mL mokraće u neprekinutom mlazu u sterilnu posudicu.

5.       čvrsto zatvoriti posudicu poklopcem ne dotičući ga prstima s unutrašnje strane

- u muškaraca:

         1.   povući čistim prstima kožni nabor spolovila

         2.   obrisati vrh spolovila čistom, vlažnom papirnatom maramicom

3.       ispustiti prvi mlaz mokraće u toalet.

4.       izmokriti (drugi mlaz) oko 50 mL. mokraće u neprekinutom mlazu u sterilnu posudicu

5.       čvrsto zatvoriti posudicu poklopcem ne dotičući ga prstima s unutašnje strane

·        uzorak mokraće treba dostaviti u laboratorij u roku od dva sata;

·        ukoliko to nije moguće uzorak treba pohraniti na  +4°C i dostaviti u laboratorij  najkasnije unutar 24 sata od uzimanja uzorka;

·         postupak uzimanja uzorka mokraće za dokaz infekcije mikoplazmama, ureaplazmama i klamidijama isti je kao i za standardnu bakteriološku i mikološku pretragu mokraće, osim što je potrebno uzeti prvi mlaz prve jutarnje mokraće;

·        postupak uzimanja uzorka mokraće za dokaz tuberkuloze isti je kao i za standardnu bakteriološku i mikološku pretragu mokraće osim što je potrebno uzeti više uzoraka tijekom 3 do 5 dana;

·        uzorak mokraće za izolaciju anaerobnih bakterija treba uzeti suprapubičnom punkcijom;

·         rezultati standardne bakteriološke i mikološke pretrage dostupni su za 3-7 dana;

·         rezultati izolacije i identifikacije mikoplazma i ureaplazma dostupni su za 10 dana;

·         rezultati pretrage na Chlamydia trachomatis PCR-metodom dostupni su za 1-2 dana;

·         rezultati izolacije i identifikacije anaerobnih bakterija dostupni su za 8-14 dana;

·        izravna pretraga za dokaz Mycobacterium tuberculosis (mikroskopija i molekularna dijagnostika) traje 24 sata;

·         kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;

·        ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Uzorak mokraće za virološku pretragu

·         postupak uzimanja uzorka mokraće je isti kao i za standardnu bakteriološku i mikološku pretragu mokraće osim što je potrebno uzeti prvi mlaz prve jutarnje mokraće;

·         rezultati virološke pretrage dostupni su za 3-14 dana.

Uzorak mokraće za parasitološku pretragu

·        za dokaz trihomonoze treba uzeti prvi mlaz prve jutarnje mokraće i dostaviti u laboratorij u roku od 2 sata na temperaturi od 30-37ºC (u džepu uz tijelo u dobro zatvorenoj sterilnoj posudici);

·         rezultat parasitološke dijagnostike trihomonoze dostupan je za 3 dana;

·        za dokaz shistosomoze treba uzeti zadnji mlaz prve jutarnje mokraće i dostaviti u laboratorij najkasnije za 48 sati;

·         rezultat parasitološke dijagnostike shistosomoze dostupan je za 24 sata.

OBRISAK CERVIKSA, VAGINE I URETRE I EJAKULAT- EKSPRIMAT

Uzorci spolnomokraćnog sustava ŽENA za bakteriološku, mikološku i parasitološku pretragu

·         obriske (cerviksa, vagine i uretre) iz spolnomokraćnog sustava žena uzima ginekolog i pohranjuje u odgovarajući transportni medij za izolaciju bakterija (npr. Stuartov medij, Amiesov medij, medij za klamidije) i parasita - trihomonasa (npr. Diamondov medij). Za izolaciju kvasaca nije potrebno obriske slati u transportnom mediju;

·         uzorke za bakteriološku i mikološku pretragu treba dostaviti u laboratorij u roku od 2 sata ili najkasnije unutar 24 sata od uzimanja ako su pohranjeni na + 4ºC do dostave;

·         uzorke za parasitološku pretragu treba poslati u laboratorij tijekom 2 sata od uzimanja i kroz to vrijeme moraju biti pohranjeni na 30-37º (npr. u džepu uz tijelo ili u prijenosnom termostatu). Uzorci ne smiju biti pohranjeni na sobnoj temperaturi ili na temperaturi hladnjaka (+4ºC);

·         pretraga na mikoplazme traje 2-6 dana;

·         pretraga na trihomonas traje 3-4 dana;

·         pretraga na kvasce traje 3-7 dana;

·         pretraga na gardnerelu, gonokok i druge aerobne bakterije traje 7-10 dana;

·         pretraga na klamidije traje 7-14 dana;

·         pretraga na klamidije PCR-metodom traje 1-2 dana (Chlamydia trachomatis);

·        za izolaciju anaerobnih bakterija koriste se bioptički uzorci, punktati i intraoperativno uzeti uzorci a pretraga traje 12-18 dana.

Uzorci spolnomokraćnog sustava MUŠKARACA za bakteriološku, mikološku i parasitološku pre-tragu

·         obrisak uretre može uzeti liječnik u prijemnoj ambulanti Službe za mikrobiologiju Zavoda ili ordinarius;

·         bolesnik ne bi smio mokriti bar 4 sata prije uzimanja uzorka;

·         obrisak uretre za bakteriološku u parasitološku pretragu treba pohraniti u transportni medij (npr. Stuartov, Amiesov medij, za klamidije, za trihomonas) i dostaviti u laboratorij u roku od 2-4 sata;

·         obrisak uretre za mikološku pretragu ne treba pohraniti u transportni medij do dostave u laboratorij;

·         pretraga na mikoplazme traje 2-6 dana;

·         pretraga na trihomonas traje 3-4 dana;

·         pretraga na kvasce traje 3-7 dana;

·         pretraga na gardnerelu, gonokok i druge aerobne bakterije traje 7-10 dana;

·         pretraga na klamidije traje 7-14 dana;

·         pretraga na klamidije PCR-metodom traje 1-2 dana (Chlamydia trachomatis);

·         uzorak ejakulata može se dati u Zavodu ili može biti dostavljen u sterilnoj plastičnoj posudici najkasnije 2 sata od uzimanja;

·         za dokaz trihomonijaze uzorak ejakulata treba dostaviti na temperaturi od 30-37ºC (u džepu uz tijelo ili u pokretnom termostatu);

·         pretraga na mikoplazme i druge bakterije traje 2-6 dana;

·         pretraga na trihomonas traje 3-4 dana;

·         pretraga na kvasce traje 3-7 dana;

·        u bolesnika s kroničnom infekcijom spolnomokraćnog sustava može se za dokaz klamidija koristiti i uzorak ejakulata ili eksprimata prostate;

·        eksprimat prostate uzima liječnik u Urološkoj ambulanti Klinike za infektivne bolesti «Dr. Fran Mihaljević» u Zagrebu a uzorak treba dostaviti u laboratorije Zavoda unutar 1-2 sata od uzimanja;

·         rezultat pretraga na klamidije iz ovih uzoraka traje 14 dana.

Zadnja promjena 15.09.2006.