Upute za uzimanje i slanje uzoraka

Ovdje su navedeni načini uzimanja uzoraka i mikrobiološke pretrage koje provodi Hrvatski zavod za javno zdravstvo.

Telefon mikrobiološke ambulante: 01 48 63 236

 

Opća pravila za uzimanje uzoraka

Upute za uzimanje i slanje uzoraka

 

OPĆA PRAVILA ZA UZIMANJE UZORAKA

Kada se šalju uzorci kliničkog materijala za mikrobiološke pretrage, treba uvijek imati na umu da će rezultati biti onoliko dobri koliko su dobri i poslani uzorci.

Za pouzdane rezultate mikrobioloških pretraga je od najveće važnosti odabrati odgovarajući uzorak kliničkog materijala, pravilno ga uzeti (u pravo vrijeme, s odgovarajućeg mjesta i u dovoljnoj količini), kao i dostaviti ili eventualno čuvati. Ne bi trebalo štedjeti na količini uzorka.

Suradnja liječnika i drugog medicinskog osoblja koje se brine o bolesniku i mikrobiološkog laboratorija je neophodna da bi se dobili rezultati koji će se moći primijeniti na dobrobit bolesnika.

Stoga je potrebno slijediti protokol o pravilnom odabiru, uzimanju i sigurnom rukovanju uzorka kliničkog materijala pri slanju u laboratorij.

Opća pravila uzimanja uzorka kliničkog materijala za mikrobiološku pretragu 

  • Uzorak mora potjecati s mjesta infekcije da bi se otkrio etiološki uzročnik.
  • Uzorak treba uzeti u pravilu prije početka antimikrobne terapije, a ako to nije moguće, potrebno je navesti terapiju koja je primijenjena.
  • Uzorak treba pohraniti u sterilnu posudicu čiji zatvarač dobro prijanja.
  • Treba izbjegavati kontaminaciju uzorka fiziološkom florom.
  • Posudica s uzorkom mora biti pravilno označena, tj. obavezno treba staviti naljepnicu s imenom i prezimenom bolesnika.
  • Na uputnici uz opće identifikacijske podatke bolesnika obvezno treba navesti vrstu uzorka, datum i vrijeme uzimanja, dijagnozu i/ili vodeće simptome, laboratorijske i epidemiološke podatke.
  • Na uputnici treba navesti pretragu koja se traži, a ako nije navedena, laboratorij će sam odrediti pretragu uzimajući u obzir uputnu dijagnozu, dob, spol i ostale relevantne podatke s kojima raspolaže.
  • Uzorci se mogu uzimati u prijemnoj ambulanti Službe za mikrobiologiju HZJZ-a ili u drugoj medicinskoj ustanovi i dostavljeni osobno što prije (u pravilu u roku od 2 – 3 sata ) nakon uzimanja.
  • Neki uzorci se mogu poslati poštom (stolica na ciste i helminte, serum, trajni preparati). U tom slučaju treba obratiti pozornost na ambalažu za slanje infektivnih uzoraka kliničkog materijala odnosno uzorci moraju uvijek biti dobro zatvoreni u čvrst paket (nikako ne u kovertu) kako bi se izbjeglo lomljenje ambalaže u transportu i istjecanje uzorka zbog opasnosti od infekcije!
  • Neki se uzorci moraju pohraniti u posebna transportna hranilišta koja se mogu nabaviti u laboratorijima Službe za mikrobiologiju HZJZ-a.

UPUTE ZA UZIMANJE I SLANJE UZORAKA

Uzorci:

Stolica (feces)

Uzorak stolice za bakteriološku pretragu

  • Uzorak stolice treba uzeti na početku bolesti, u pravilu prije početka antibiotičkog liječenja.
  • Uzorak stolice ne smije biti kontaminiran mokraćom niti sadržavati dezinficijense i deterdžente.
  • Potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka čvrste stolice (veličina lješnjaka) u sterilnoj posudici koja se stavi u drvenu    kutijicu.
  • Uzorak stolice treba dostaviti u prijemnu ambulantu najkasnije dva sata nakon uzimanja. Ako to nije moguće, uzorak se može pohraniti na +4 °C najduže 24 sata do dostave u prijemnu ambulantu. Preporučuje se da se uzorak stolice veličine zrna papra stavi u transportni medij i pošalje u prijemnu ambulantu.
  • Uzorak stolice za pretragu na Helicobacter pylori mora obavezno biti dostavljen u prijemnu ambulantu istoga dana kad je i uzet!
  • Obrisak rektuma treba uzeti jedino kada nije moguće dobiti uzorak stolice (djeca, teški bolesnici). Bris treba uložiti 2,5 cm iza analnog sfinktera i nježno zarotirati. Na brisu moraju biti vidljivi tragovi stolice. Daljnji postupak kao s uzorkom stolice.
  • Obrisak rektuma za izolaciju vrste N. gonorrhoeae treba slati u transportnom mediju.
  • Rezultati bakteriološke pretrage uzorka stolice ili obriska rektuma dostupni su za tri dana.

Uzorak stolice za virološku pretragu

  • Uzorak stolice uzeti u prva tri dana od početka  simptoma (najbolje 2 uzorka stolice unutar 24 sata).
  • Potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka čvrste stolice  (veličina lješnjaka) u sterilnoj posudici.
  • Uzorak stolice treba odmah dostaviti u prijemnu ambulantu, a ako to nije moguće, uzorak se može pohraniti na +4 °C najduže 48 sati. Dostavlja se u putnom hladnjaku ili termos boci.
  • Ako nije moguće uzorke stolice dostaviti tijekom 48 sati, treba se posavjetovati s liječnikom mikrobiologom.
  • Uzorak stolice može biti pohranjen duže vrijeme na temperaturi od –18 °C i niže.
  • Zamrznuti uzorak stolice treba dostaviti u prijemnu ambulantu na ledu u termos boci.
  • Rezultati virološke pretrage uzorka stolice su dostupni za 2-14 dana.

Uzorak stolice za parazitološku pretragu

  • Potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka čvrste stolice (veličina lješnjaka).
  • Uzorak stolice treba odmah dostaviti u prijemnu ambulantu ili ga pohraniti na +4 ºC tijekom 24-48 sati.
  • Za dokaz amebne dizenterije, uzorak proljevaste stolice mora biti pregledan najduže 30 minuta od uzimanja, stoga preporučujemo prethodni dogovor s liječnikom mikrobiologom.
  • Sedam dana prije uzimanja uzorka stolice bolesnik ne smije biti pregledan radiološki uz pomoć kontrastnog sredstva, jer ovaj postupak umanjuje vjerojatnost nalaza cista crijevnih protista.
  • Za dokaz kriptosporidioze se rutinski obrađuju samo uzorci proljevaste stolice – kada se kriptosporidioza želi dokazati pretragom uzorka čvrste stolice potrebno je to naznačiti na uputnici.
  • Rezultati parazitološke pretrage uzorka stolice dostupni su za 1-3 dana.

Uzorak stolice za mikološku pretragu

  • Potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka čvrste stolice (veličina lješnjaka).
  • Uzorak stolice treba odmah dostaviti u prijemnu ambulantu ili ga pohraniti na +4 ºC tijekom 24-48 sati.
  • Uzorak stolice treba uzeti 7-10 dana nakon završene antibiotičke terapije.
  • Rezultati mikološke pretrage uzorka stolice dostupni su za 3-5 dana.

Perianalni otisak

Perianalni otisak za dokaz jaja parazita Enterobius vermicularis

  • Predmetno stakalce (26 x 76 mm) s ljepljivom trakom («selotejp») može se dobiti u parazitološkom laboratoriju Službe za mikrobiologiju Zavoda ili se načiniti u ambulanti.
  • Perianalni otisak treba uzeti ujutro nakon ustajanja, a prije pranja ili kupanja.
  • Ljepljivu traku treba odlijepiti sa stakalca, raširiti gluteuse i nalijepiti traku preko perianalnih nabora uz blago pritiskanje.
  • Traku zatim skinuti i nalijepiti ponovo preko stakalca.
  • Predmetno stakalce treba staviti u ambalažu i dostaviti u prijemnu ambulantu tijekom 24 sata.
  • Rezultat pretrage dostupan je za 24 sata.

Obrisak ždrijela i tonzila

Obrisak ždrijela i tonzila za bakteriološku pretragu

  • Drvenom lopaticom pritisnuti jezik i laganom rotacijom štapića obloženog vatom (bris) uz pritisak obrisati tonzile, tonzilarne lože i ždrijelo pazeći da se ne dotakne jezik ili sluznica usne šupljine.
  • Kada su vidljivi gnojni čepići na tonzilama treba ih obrisati.
  • Uzorak treba dostaviti u prijemnu ambulantu u roku od dva sata od uzimanja.
  • Ako to nije moguće, obrisak treba uložiti u transportni medij Stewart, pohraniti ga na sobnoj temperaturi (22-25 °C) i dostaviti u prijemnu ambulantu unutar 24 sata.
  • Rezultati bakteriološke pretrage dostupni su za 1-3 dana.

Obrisak nosa za bakteriološku pretragu

  • Sterilnim brisom ovlaženim u fiziološkoj otopini treba obrisati vestibulum nosa rotirajućm pokretima.
  • Uzorak treba dostaviti u laboratorij u roku od dva sata od uzimanja. Ako to nije moguće, obrisak treba uložiti u transportni medij Stewart ili Amies, pohraniti ga na sobnoj temperaturi (22-25 °C) i dostaviti u prijemnu ambulantu u roku od 24 sata
  • Uzorak se uzima za otkrivanje stafilokoknog ili streptokoknog kliconoštva ili za ispitivanje lezije u nosu.

Obrisak nazofarinksa za bakteriološku pretragu

  • Rotirajući uvesti tanki sterilni vateni štapić u stražnji nazofarinks; pustiti da se bris natopi sekretom te ga nasaditi na hranjivu podlogu ili u transportni medij. Bris se uzima iz obje nosnice, osim ako se ne dobije dovoljno materijala već nakon obriska prve nosnice. Samo na posebno traženje liječnika uzima se, na isti način, obrisak za izolaciju Bordetella pertussis; tada je važno uzimati uzorak štapićem koji je priložen uz transportnu podlogu u koju se odmah po uzimanju uzorka vraća.
  • Uzorak treba dostaviti u laboratorij u roku od dva sata od uzimanja. Ako to nije moguće, obrisak treba uložiti u transportni medij Stewart ili Amies, pohraniti ga na sobnoj temperaturi (22-25 °C) i dostaviti u prijemnu ambulantu Z roku od 24 sata
  • Za izolaciju zahtjevnijih bakterija treba koristiti dakronski, rajonski ili kalginatni bris.

Obrisak ždrijela i tonzila za mikološku pretragu

  • Drvenom lopaticom pritisnuti jezik i laganom rotacijom uz pritisak  štapićem obloženim vatom obrisati tonzile, tonzilarne lože i ždrijelo, pazeći da se ne dotakne jezik ili sluznica usne šupljine.
  • Kada su vidljivi gnojni čepići na tonzilama, treba ih obrisati.
  • Uzorak treba dostaviti u laboratorij u roku od 24 sata ili se obrisak može uzeti u prijemnoj ambulanti Službe za mikrobiologiju Zavoda.
  • Rezultati mikološke pretrage dostupni su za 3-5 dana.

Duboki obrisak ždrijela (stražnje stijenke farinksa) i obrisak nazofarinksa za virološku pretragu

  • Duboki obrisak ždrijela (stražnje stijenke farinksa) treba uzeti rotirajućim pokretima, uz pritisak, izbjegavajući jezik, tonzile i sluznicu usne šupljine.
  • Obrisak nazofarinksa uzima se kao i za bakteriološku pretragu.
  • Obrisak se uzima u prva tri dana bolesti.
  • Obrisak treba uroniti u transportnu podlogu (Hanks), pohraniti na +4 °C i dostaviti u prijemnu ambulantu najkasnije u roku od 24 sata.
  • U nedostatku transportne podloge može se koristiti sterilna fiziološka otopina, uz naznaku na uputnici.
  • Suhi obrisak i obrisak pohranjen na -18 ºC nije pogodan za virološke pretrage.
  • Rezultati virološke pretrage dostupni su za 24 sata.

Nazofaringealni sekret

Uzorak nazofaringealnog sekreta za virološku pretragu

  • Uzorak se u manje djece uzima mukoznim ekstraktorom, vakuum pumpom i sondom uz eventualnu prethodnu aplikaciju 1 mL sterilne fiziološke otopine.
  • Uzorak u dobro zatvorenom ekstraktoru treba odmah poslati u laboratorij ili ga pohranjenog na +4 ºC dostaviti u prijemnu ambulantu najkasnije 24 sata nakon uzimanja.
  • Za virološku pretragu je najkvalitetniji uzorak gornjeg dišnog sustava.
  • Rezultati virološke pretrage dostupni su za 24 sata.

Obrisak larinksa

Obrisak larinksa na mikobakteriološku pretragu

  • U bolesnika koji ne može dati dobar uzorak iskašljaja, obrisak larinksa treba uzeti ujutro, natašte.
  • Obrisak treba prije uzimanja umočiti u sterilnu destiliranu vodu ili fiziološku otopinu, a metalni dio lagano saviti da prati nagib jezika.
  • Neposredno prije uzimanja obriska bolesnik se mora nakašljati.
  • Uzorak treba što prije dostaviti u prijemnu ambulantu ili pohraniti na +4 ºC do slanja u laboratorij.
  • Izravna pretraga za dokaz Mycobacterium tuberculosis (mikroskopija i molekularna dijagnostika) traje 24 sata.
  • Kultivacija Mycobacterium tuberculosis traje do šest tjedana.
  • Ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Sputum (iskašljaj)

Uzorak sputuma za bakteriološku i mikološku pretragu

  • Jutarnji iskašljaj je najpogodniji uzorak.
  • Prije uzimanja sputuma bolesnika treba uputiti o ispravnom postupku davanja uzorka.
  • Bolesnik treba oprati zube četkicom bez zubne paste i isprati usta vodom da bi se smanjio broj popratnih bakterija, dijelova hrane ili ostataka lijekova.
  • Kad god je moguće, poželjno je nadzirati davanje uzorka iskašljaja.
  • Važno je upozoriti bolesnika da nazofaringealni sekret ili slina nisu iskašljaj.
  • Bolesnik se treba duboko nakašljati i izbaciti iskašljaj (5-10 mL) u sterilnu posudu.
  • Uzorak iskašljaja treba dostaviti u laboratorij u roku od dva sata, a najkasnije 24 sata od uzimanja uz pohranu na +4 °C.
  • Za dokaz tuberkuloze preporučuje se uzimanje serije od najmanje tri uzorka iskašljaja (u sterilnoj posudici s čepom na navoj) tijekom tri uzastopna dana (obično ne više od šest). Posudica mora biti dostavljena u plastičnoj vrećici. Ne smije se skupljati više uzoraka u jednoj posudici.
  • Za dokaz pneumocistoze iskašljaj nije odgovarajući uzorak (pogodni uzorci kliničkog materijala su bronhoalveolarni lavat, inducirani sputum i bioptat pluća).
  • Rezultati standardne bakteriološke pretrage dostupni su za 2-5 dana;
  • rezultati izravne dijagnostike tuberkulpze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupni su za 24 sata;
  • kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;
  • ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana;
  • rezultati mikološke pretrage dostupni su za 3-7 dana.

Inducirani sputum

Uzorak induciranog sputuma na mikobakteriološku i mikološku pretragu

  • prije inhalacije bolesnik treba isprati usnu šupljinu vodom i očistiti zube četkicom (bez zubne paste) i popiti 2 čaše vode;
  • za inhalaciju se koristi oko 25 mL 3-5 % sterilne otopine NaCl;
  • bolesnik inhalira aerosol uz pomoć ultrasoničnog inhalatora oko 20 minuta;
  • tijekom inhaliranja, svakih 5 minuta, bolesnik duboko iskašlje u sterilnu posudu (svaki iskašljaj posebno);
  • uzorak induciranog iskašljaja koristi se za dokaz Mycobacterium tuberculosis (i drugih vrsta mikobakterija) te dokaz Pneumocystis carinii (i drugih vrsta gljiva);
  • izravni dokaz Mycobacterium tuberculosis (mikroskopija i molekularna dijagnostika) traje 24 sata;
  • kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;
  • ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana;
  • izravni dokaz Pneumocystis carinii traje 3-24 sata (kultivacija nije moguća);
  • izravna dijagnostika drugih gljivičnih vrsta traje također 24 sata a kultivacija 7-28 dana (za dokaz termalno dimorfnih gljiva).

Uzorak aspirata bronha i bronhoalveolarnog lavata (bal)

Uzorak aspirata bronha i bronhoalveolarnog lavata za mikobakteriološku pretragu

  • treba poslati što veću količinu uzorka uz što manji sadržaj anestetika koji može spriječiti rast mikobakterija;
  • uzorak treba što prije dostaviti u laboratorij ili ga treba pohraniti do dostave na +4 ºC;
  • rezultat izravne dijagnostike tuberkuloze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupan je za 24 sata;
  • kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;
  • ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Uzorak aspirata bronha i bronhoalveolarnog lavata za mikološku pretragu

  • treba poslati što veću količinu uzorka;
  • uzorak treba odmah po uzimanju dostaviti u prijemnu ambulantu ili ga treba pohraniti do dostave na + 4 ºC;
  • rezultat izravne dijagnostike (mikroskopija) plućne mikoze (i pneumocistoze) dostupan je za 24 sata;
  • rezultati izolacije i identifikacije gljiva dostupan je za 3-7 dana.

Želučani aspirat / lavat

Uzorak želučanog  aspirata/lavata za mikobakteriološku pretragu

  • uzorak se najčešće uzima djeci koja ne mogu dati iskašljaj niti nakon inhalacije aerosola;
  • potrebno je aspirirati 50 mL želučanog sadržaja rano ujutro dok bolesnik još leži u krevetu, nakon mirovanja od najmanje 8-10 sati;
  • odmah po uzimanju uzorak treba neutralizirati otopinom Na2HPO4  (na 35-50 mL lavata dodati 1,5 mL 40 % Na2HPO4);
  • rezultat izravne dijagnostike tuberkuloze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupan je za 24 sata;
  • kultivacija Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;
  • ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28.

Uzorci pleuralne, peritonejske i zglobne tekućine

Uzorci pleuralne, peritonejske i zglobne tekućine za bakteriološku i mikološku dijagnostiku

  • najmanje 1 mL uzorka (u sterilnoj epruveti s čepom na navoj) treba poslati odmah u laboratorij;
  • ako to nije moguće uzorak treba pohraniti na +4 ºC i dostaviti u laboratorij unutar 24 sata od uzimanja;
  • rezultati izravne dijagnostike (mikroskopija i /ili imunodijagnostika) dostupni su za 24 sata;
  • rezultati izolacije i identifikacije aerobnih bakterija i kvasaca dostupni su za 5-7 dana;
  • rezultati izolacije anaerobnih bakterija dostupni su za 12-18 dana;
  • rezultat izravne dijagnostike tuberkuloze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupan je za 24 sata;
  • kultivacija Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;
  • ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Obrisak spojnice oka

Obrisak spojnice oka za bakteriološku, virološku i mikološku pretragu

  • ako nema dovoljno eksudata (spojnica je suha) prije uzimanja obriska, obrisak (drveni štapić s vatom) treba umočiti u transportni medij ili sterilnu fiziološku otopinu;
  • treba dobro obrisati spojnicu donje vjeđe i forniksa od vanjskog prema unutarnjem kutu oka;
  • ako treba uzeti obrisak spojnice oba oka, za svako oko treba koristiti poseban bris i dostaviti u prijemnu ambulantu odvojeno, svakog u svojem sterilnom kontejneru;
  • uzorci se mogu uzeti u laboratorijima Službe za mikrobiologiju Zavoda ili mogu biti uzeti u ambulantama;
  • obriske treba dostaviti u prijemnu ambulantu što prije, najbolje u roku od dva sata;
  • ako to nije moguće obriske u transportnoj podlozi treba dostaviti tijekom 24 sata. Uzorke za bakteriološku i mikološku pretragu treba dostaviti u torbi na 20-25 ºC, a uzorke za virološku pretragu u termosici na +4 °C;
  • za dokaz trahoma preporučujemo uzimanje obrisaka spojnice oka u prijemnoj ambulanti Službe za mikrobiogiju ili prema dogovoru s liječnikom mikrobiologom;
  • rezultati bakteriološke pretrage dostupni su za 4 dana (gram-pozitivne i gram-negativne bakterijske vrste), a do 7 dana (klamidije);
  • rezultati mikološke pretrage dostupni su za 5-7 dana;
  • rezultati virološke pretrage dostupni su za 24 sata.

Uzorak strugotine rožnice

Uzorak strugotine rožnice za parazitološku pretragu

  • za dokaz amebnog keratitisa treba uzeti strugotinu (abrazivni materijal) rožnice, staviti u 1 mL Pageove ili sterilne fiziološke otopine i dostaviti što prije u laboratorij;
  • preporučujemo prethodno kontaktirati liječnika mikrobiologa radi pripreme podloge;
  • preporučujemo uzorak uzeti u parazitološkom laboratoriju uz prethodni dogovor;
  • rezultati parazitološke pretrage dostupni su za  1-14 dana.

Uzorak strugotine rožnice za mikološku pretragu

  • za dokaz gljivične infekcije rožnice (keratomikoze) treba uzeti strugotinu rožnice, staviti u 1 mL sterilne fiziološke otopine i dostaviti što prije u laboratorij (za izolaciju gljiva);
  • preporučuje se strugotine rožnice pohraniti  u sterilnu epruvetu te odmah dostaviti u prijemnu ambulantu (radi izrade mikroskopskih preparata);
  • rezultat izravne dijagnostike (mikroskopija) keratomikoze dostupan je za 24 sata;
  • rezultati izolacije i identifikacije gljiva dostupni su za 5-7 dana.

Uzorci iz rane, ulkusa, apscesa i dekubitusa

Uzorci iz rane, ulkusa, apscesa i dekubitusa za bakteriološku i mikološku  pretragu

  • ranu, ulkus, apsces i dekubitus treba očistiti sterilnom fiziološkom otopinom, a okolnu kožu 76 %-tnim alkoholom;
  • kruste i nekrotično tkivo treba odstraniti;
  • uzorak treba uzeti s odgovarajućeg mjesta – s ruba rane, uz stijenke apscesa;
  • za dokaz uzročnika može se koristiti aspirat, komadići tkiva ili stijenke apscesa. Obrisak centra rane ima najmanju dijagnostičku vrijednost;
  • uzorke treba dostaviti odmah u prijemnu ambulantu;
  • ako to nije moguće uzorak treba pohraniti u  Stuartov transportni medij na sobnu tempera-turu (20-25 °C) i dostaviti u prijemnu ambulantu u roku od 24 sata;
  • na uputnici treba navesti vrstu uzorka, anatomsko mjesto odakle je uzorak uzet, antimikrobnu terapiju i druge važne podatke o bolesniku (npr. diabetes mellitus, bolesti imunološkog sustava, liječenje kortikosteroidima i dr.);
  • na uputnici treba navesti koja se pretraga traži (npr. izolacija aerobnih i/ili anaerobnih bakterija, izolacija kvasaca, dokaz MRSA);
  • rezultati izolacije i identifikacije aerobnih bakterija i kvasaca dostupni su za 3-7 dana a anaerobnih bakterija za 12-18 dan.

Uzorci iz ulkusa za parazitološku pretragu

  • za pretragu na uzročnika kožne lišmanioze uzima se punktat zdravog ruba lezije. Injekcijskom iglom sa špricom u kojoj se nalazi 1 mL sterilne fiziološke ubode se u zdravi rub lezije, nekoliko puta zarotira iglom, uštrca fiziološka otopina  i odmah aspirira. Dobiveni se uzorak odmah ucijepi u hranilište. Preporučujemo ovaj postupak načiniti u Parazitološkom laboratoriju Zavoda;
  • može se uzeti bioptički materijal sa zdravog ruba kožne promjene, staviti u 1 mL sterilne fiziološke otopine i dostaviti odmah u prijemnu ambulantu.

Bioptički uzorak tkiva

Bioptički uzorak tkiva za bakteriološku, mikološku, virološku i parazitološku pretragu

  • bioptat treba staviti u sterilnu fiziološku otopinu i odmah dostaviti u prijemnu ambulantu;
  • bioptički uzorak i aspirat za dijagnozu kožne lišmenioze preporučamo oduzeti u parazitološkom laboratoriju HZJZ;
  • rezultati izravne dijagnostike (mikroskopije)  dostupni su za 24 sata;
  • rezultati izolacije i identifikacije uzročnika dostupni su za 2-21 dan.

Uzorci za serološke pretrage

Uzorak seruma ili krvi

  • uzeti 3-5 mL krvi (10 mL ukoliko se traži više pretraga) natašte i bez antikoagulansa;
  • u laboratorij može biti dostavljen uzorak krvi ili seruma;
  • uzorak seruma može biti pohranjen nekoliko tjedana na +4-8 °C, a na –18 °C i mnogo duže;
  • uzorak krvi ne smije biti zamrznut jer nastupa hemoliza te je takav uzorak neupotrebljiv za serološko testiranje;
  • hilozan, hemoliziran ili zagađen uzorak seruma nije pogodan za serološke pretrage;
  • radi utvrđivanja dinamike protutijela treba uzeti parni serum u roku od 2-3 tjedna, a u bolesnika sa sumnjom na lymsku boreliozu  4-6 tjedana nakon prvog seruma;
  • rezultat seroloških pretraga dostupni su za 2-15 dana.

Uzorak cerebrospinalnog likvora

  • uzorak likvora može biti ponekad korišten za serološke pretrage;
  • uzorak likvora ne smije biti hemoragičan, a testira se usporedno s uzorkom seruma istog bolesnika;
  • pohranjuje se na isti način kao i uzorak seruma;
  • rezultat seroloških pretraga dostupni su za 2-15 dana.

Uzorci drugih tjelesnih tekućina

  • uzorci ostalih tjelesnih tekućina (npr. očna vodica) koriste se iznimno za serološke pretrage usporedno sa serumom  istog bolesnika.

Krv za hemokulturu

Uzorak krvi (hemokultura) za bakteriološku i mikološku pretragu

  • uzorak krvi treba uzeti venepunkcijom u trenutku porasta tjelesne temperature u pravilu prije početka antibiotičke terapije;
  • nije preporučljivo uzimati uzorak krv iz intravenskog katetera;
  • uzorak krvi treba odmah uz bolesnički krevet ucijepiti u tekuće hranilište za kultivaciju aerobnih bakterija i gljiva (aerobno hranilište) i anaerobnih bakterija (anaerobno hranilište) prema uputi proizvođača hranilišta;
  • uzorke krvi za hemokulturu treba uzeti  2-3 puta tijekom 24 sata;
  • količina uzorka krvi: 3-10 mL krvi odrasle osobe u svaku bočicu;
  • količina uzorka krvi:1-3 mL krvi djece u svaku bočicu;
  • ucijepljena hranilišta (hemokulture) treba odmah dostaviti u laboratorij, a ako to nije moguće, hemokulture treba pohraniti u termostat na 37 °C kroz 20 sati. Ako dostava niti tada nije moguća, hemokulture mogu biti pohranjene najduže 48 sati na 22-25 °C i tada dostavljene u laboratorij u termos boci na istoj temperaturi;
  • za dokaz tuberkuloze treba uzeti 5-10 mL krvi u sterilnu epruvetu sa čepom na navoj i dodati heparin (0,2 mg/mL) ili 1,5 mL 0,35 % otopine natrijevog polietanol sulfata (SPS) na 8,5 mL krvi  da se spriječi grušanje krvi. Moguće je uzorak krvi odmah po uzimanju ucijepiti u komercijalno dostupne medije sa saponinom “Isolator tube” (Oxoid);
  • rezultati izolacije i identifikacije aerobnih bakterija dostupni su za 2-5 dana;
  • rezultati izolacije i identifikacije anaerobnih bakterija dostupni su za 12-18 dana;
  • rezultati izolacije i identifikacije gljiva (kvasaca i nekih vrsta plijesni) dostupni su za 3-7 dana;
  • izravni dokaz Mycobacterium tuberculosis (mikroskopija i molekularna dijagnostika) traje 24 sata;
  • kultivacija Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;
  • ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Uzorak krvi za izradu preparata

Uzorak krvi za parazitološku pretragu

  • za dokaz malarije treba uzeti jednu (za izradu preparata krvnog razmaza) i 2-3 kapi krvi (za izradu preparata guste kapi) iz jagodice prsta bolesnika;
  • za izradu preparata krvnog razmaza: jednu kap krvi kapnuti na rub čistog predmetnog stakalca (veličina 26×76 mm) a drugim stakalcem položenim pod kutem od 45º razvući kap krvi u jednom potezu. Osušiti na zraku i poslati u laboratorij.
  • za izradu preparata guste kapi: na sredinu  predmetnog stakalca kapnuti 2-3 kapi krvi i vrhom drugog stakalca spojiti kapi u krug promjera 1,0 cm. Osušiti na zraku i poslati u laboratorij.
  • za dokaz filarioze treba uzeti uzorke krvi za izradu preparata krvnog razmaza i guste kapi uzimajući u obzir periodično pojavljivanje mikrofilarija u krvnoj cirkulaciji (dnevno-noćni ritam). Zbog potrebe dodatnih pretraga krvi i tkiva u bolesnika oboljelih od filarioze preporučujemo konzultiranje liječnika mikrobiologa u Parazitološkom laboratoriju Zavoda;
  • rezultati parazitoloških preraga krvi dostupni su u roku 24 sata.

Uzorak koštane srži

Uzorak koštane srži za mikobakteriološku pretragu

  • treba aspirirati najmanje 0,5 mL koštane srži u sterilnu epruvetu sa čepom na navoj i dodati heparin (0,2 mg/mL);
  • uzorak aspirata koštane srži može se odmah po uzimanju ucijepiti u komercijalno dostupni medij sa saponinom “Isolator tube” (Oxoid);
  • uzorak treba odmah dostaviti u laboratorij ili pohraniti na +4 ºC;
  • rezultat izravne dijagnostike tuberkuloze (mikroskopija i molekularna dijagnostika) dostupan je za 24 sata;
  • kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana;
  • ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Uzorak koštane srži za mikološku pretragu

  • treba aspirirati najmanje 0,5 mL koštane srži u sterilnu epruvetu sa čepom na navoj i dodati heparin (0,2 mg/mL);
  • uzorak treba odmah dostaviti u laboratorij;
  • koštana srž najpogodniji je uzorak kliničkog materijala za dokaz histoplazmoze;
  • rezultat izravne dijagnostike (mikroskopija) histoplazmoze dostupan je za 24 sata;
  • rezultat kultivacije histoplazme dostupan je za 7-28 dana.

Uzorak koštane srži za parazitološku pretragu (na lišmaniozu)

  • treba aspirirati 1-2 mL koštane srži u sterilnu epruvetu  s antikoagulansom;
  • uzorak treba odmah dostaviti u laboratorij;
  • preporučujemo uzorak koštane srži za kultivaciju odmah kod vađenja ucijepiti u hranilište «Tobie» prethodno naručeno u parazitološkom laboratoriju HZJZ-a, slijedeći pri tom priloženu uputu;
  • koštana srž najpogodniji je uzorak kliničkog materijala za dokaz visceralne lišmenioze (kala azar);
  • rezultat izravne dijagnostike (mikroskopija) lišmenioze dostupan je za 24 sata;
  • rezultat kultivacije lišmenija dostupan je za 2-21 dana.

Cerebrospinalni likvor

Uzorak likvora za bakteriološku i mikološku pretragu

  • uzorak likvora treba uzeti u bolničkoj ustanovi;
  • za bakteriološku pretragu uzorka likvora potreban je 1 mL likvora;
  • za mikološku pretagu uzorka likvora potrebna su 2 mL likvora;
  • uzorak likvora treba dostaviti u sterilnoj posudici u roku od 2 sata u termos boci na 20-37 °C;
  • pri sumnji na gnojni meningoencefalitis treba uzeti i uzorke krvi za hemokulturu;
  • rezultat izravne dijagnostike (mikroskopije i molekularne dijagnostike) tuberkuloze dostupan je za 24 sata;
  • kultivacija mikobakterija traje do 6 tjedana;
  • ispitivanje osjetljivosti mikobakterija na antituberkulostatike traje 7-28 dana;
  • dijagnostika gnojnog meningitisa uzrokovanog drugim bakterijskim vrstama traje 2-3 dana;
  • rezultat izravne dijagnostike gljivičnog meningoencefalitisa (tuš preparat i imunodijagnostika) dostupan je za nekoliko sati;
  • kultivacija gljivičnih uzročnika meningoencefalitisa traje od 3-7 dana (ovisno o vrsti očekivanog gljivičnog uzročnika i do 28 dana).

Uzorak likvora  za virološku pretragu

  • uzorak likvora treba uzeti u bolničkoj ustanovi;
  • za virološku pretragu uzorka likvora potreban je najmanje 1 mL likvora;
  • uzorak likvora treba dostaviti u laboratorij  u roku od 2 sata;
  • uzorak likvora može biti pohranjen na +4 ºC najduže tijekom 48 sati;
  • uzorak likvora može biti pohranjen na -70 °C neograničeno dugo;
  • uzorak likvora ne smije biti pohranjen na –18 °C (kućna ledenica);
  • zamrznuti uzorak likvora treba dostaviti u laboratorij na ledu u termos boci;
  • rezultati virološke pretrage dostupni su za 2-14 dana.

Urin (mokraća)

Uzorak mokraće za bakteriološku i mikološku pretragu

  • treba uzeti srednji mlaz prve jutarnje mokraće;
  • prije uzimanja uzorka mokraće potrebno je oprati vanjsko spolovilo toplom vodom i  sapunom, te osušiti papirnatom maramicom. Ukoliko pranje spolovila nije moguće preporučuje se sljedeći postupak:

          u  žena:

  1. raširiti čistim prstima velike usne spolovila
  2. obrisati vanjsko spolovilo s 3-4 vlažne papirnate maramice povlačeći od naprijed prema nazad
  3. ispustiti prvi mlaz mokraće u toalet
  4. izmokriti oko 50 mL mokraće u neprekinutom mlazu u sterilnu posudicu
  5. čvrsto zatvoriti posudicu poklopcem ne dotičući ga prstima s unutrašnje strane.

          u muškaraca:

  1. povući čistim prstima kožni nabor spolovila
  2. obrisati vrh spolovila čistom, vlažnom papirnatom maramicom
  3. ispustiti prvi mlaz mokraće u toalet
  4. izmokriti (drugi mlaz) oko 50 mL mokraće u neprekinutom mlazu u sterilnu posudicu
  5. čvrsto zatvoriti posudicu poklopcem ne dotičući ga prstima s unutašnje strane.
  • uzorak mokraće treba dostaviti u laboratorij u roku od dva sata
  • ako to nije moguće, uzorak treba pohraniti na +4 °C i dostaviti u laboratorij  najkasnije u roku od 24 sata od uzimanja uzorka
  • postupak uzimanja uzorka mokraće za dokaz infekcije mikoplazmama, ureaplazmama i klamidijama isti je kao i za standardnu bakteriološku i mikološku pretragu mokraće, osim što je potrebno uzeti prvi mlaz prve jutarnje mokraće
  • postupak uzimanja uzorka mokraće za dokaz tuberkuloze isti je kao i za standardnu bakteriološku i mikološku pretragu mokraće osim što je potrebno uzeti više uzoraka tijekom 3 do 5 dana
  • uzorak mokraće za izolaciju anaerobnih bakterija treba uzeti suprapubičnom punkcijom
  • rezultati standardne bakteriološke i mikološke pretrage dostupni su za 3-7 dana
  • rezultati izolacije i identifikacije mikoplazma i ureaplazma dostupni su za 10 dana
  • rezultati pretrage na Chlamydia trachomatis PCR-metodom dostupni su za 1-2 dana
  • rezultati izolacije i identifikacije anaerobnih bakterija dostupni su za 8-14 dana
  • izravna pretraga za dokaz Mycobacterium tuberculosis (mikroskopija i molekularna dijagnostika) traje 24 sata
  • kultivacija  Mycobacterium tuberculosis traje do 6 tjedana
  • ispitivanje osjetljivosti Mycobacterium tuberculosis na antituberkulostatike traje 7-28 dana.

Uzorak mokraće za virološku pretragu

  • postupak uzimanja uzorka mokraće je isti kao i za standardnu bakteriološku i mikološku pretragu mokraće, osim što je potrebno uzeti prvi mlaz prve jutarnje mokraće;
  • rezultati virološke pretrage dostupni su za 3-14 dana.

Uzorak mokraće za parazitološku pretragu

  • za dokaz trihomonoze treba uzeti prvi mlaz prve jutarnje mokraće i dostaviti ga u laboratorij u roku od 2 sata na temperaturi od 30-37 ºC (u džepu uz tijelo u dobro zatvorenoj sterilnoj posudici);
  • rezultat parazitološke dijagnostike trihomonoze dostupan je za 3 dana;
  • za dokaz shistosomoze treba uzeti zadnji mlaz prve jutarnje mokraće i dostaviti u laboratorij najkasnije za 48 sati;
  • rezultat parazitološke dijagnostike shistosomoze dostupan je za 24 sata.

Obrisak cerviksa, vagine i uretre, ejakulat – eksprimat

Uzorci spolnomokraćnog sustava ŽENA za bakteriološku, mikološku i parazitološku pretragu

  • obriske (cerviksa, vagine i uretre) iz spolnomokraćnog sustava žena uzima ginekolog i pohranjuje u odgovarajući transportni medij za izolaciju bakterija (npr. Stuartov medij, Amiesov medij, medij za klamidije) i parazita – trihomonasa (npr. Diamondov medij). Za izolaciju kvasaca nije potrebno obriske slati u transportnom mediju;
  • uzorke za bakteriološku i mikološku pretragu treba dostaviti u laboratorij u roku od 2 sata ili najkasnije unutar 24 sata od uzimanja ako su pohranjeni na + 4 ºC do dostave;
  • uzorke za parazitološku pretragu treba poslati u laboratorij tijekom 2 sata od uzimanja i kroz to vrijeme moraju biti pohranjeni na 30-37 ºC (npr. u džepu uz tijelo ili u prijenosnom termostatu). Uzorci ne smiju biti pohranjeni na sobnoj temperaturi ili na temperaturi hladnjaka (+4 ºC);
  • pretraga na mikoplazme traje 2-6 dana;
  • pretraga na trihomonas traje 3-4 dana;
  • pretraga na kvasce traje 3-7 dana;
  • pretraga na gardnerelu, gonokok i druge aerobne bakterije traje 7-10 dana;
  • pretraga na klamidije PCR-metodom traje 1-2 dana (Chlamydia trachomatis);
  • za izolaciju anaerobnih bakterija koriste se bioptički uzorci, punktati i intraoperativno uzeti uzorci, a pretraga traje 12-18 dana.

Uzorci spolnomokraćnog sustava MUŠKARACA za bakteriološku, mikološku i parazitološku pretragu

  • obrisak uretre može uzeti liječnik u prijemnoj ambulanti Službe za mikrobiologiju Zavoda ili ordinarijus
  • bolesnik ne bi smio mokriti bar 4 sata prije uzimanja uzorka
  • obrisak uretre za bakteriološku i parazitološku pretragu treba pohraniti u transportni medij (npr. Stuartov, Amiesov medij, za klamidije, za trihomonas) i dostaviti u laboratorij u roku od 2-4 sata
  • obrisak uretre za mikološku pretragu ne treba pohraniti u transportni medij do dostave u laboratorij
  • pretraga na mikoplazme traje 2-6 dana
  • pretraga na trihomonas traje 3-4 dana
  • pretraga na kvasce traje 3-7 dana
  • pretraga na gardnerelu, gonokok i druge aerobne bakterije traje 7-10 dana
  • pretraga na klamidije PCR-metodom traje 1-2 dana (Chlamydia trachomatis)
  • uzorak ejakulata može se dati u Zavodu ili može biti dostavljen u sterilnoj plastičnoj posudici najkasnije 2 sata od uzimanja
  • za dokaz trihomonijaze uzorak ejakulata treba dostaviti na temperaturi od 30-37ºC (u džepu uz tijelo ili u pokretnom termostatu)
  • pretraga na mikoplazme i druge bakterije traje 2-6 dana
  • pretraga na trihomonas traje 3-4 dana
  • pretraga na kvasce traje 3-7 dana
  • u bolesnika s kroničnom infekcijom spolnomokraćnog sustava može se za dokaz klamidija koristiti i uzorak ejakulata ili eksprimata prostate
  • eksprimat prostate uzima liječnik u Urološkoj ambulanti Klinike za infektivne bolesti «Dr. Fran Mihaljević» u Zagrebu, a uzorak treba dostaviti u laboratorije Zavoda unutar 1-2 sata od uzimanja
  • rezultat pretraga na klamidije iz ovih uzoraka traje 1-2 dana.

Upute za uzimanje uzoraka noktiju, kože i dlaka za mikološku obradu

Bolesnik ne smije 5 dana prije uzimanja uzoraka za mikološku dijagnostiku tretirati oboljelo područje pripravcima koji sadrže antimikotike (lijekove za liječenje gljivičnih infekcija). Na dan uzimanja uzorka koža se ne smije tretirati kozmetičkim preparatima i šminkom, a nokti ne smiju biti lakirani.